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利用高校液相色譜儀直接分析氨基酸物質

  摘要:氨基酸是生物功能大分子蛋白質的基本組成單位,是構成動物營養所需蛋白質的基本物質。是含有一個堿性氨基和一個酸性羧基的有機化合物。氨基連在α-碳上的為α-氨基酸。組成蛋白質的氨基酸均為α-氨基酸。

  高效液相色譜儀直接分析氨基酸物質:

  樣品:12種未衍生氨基酸混合物溶液(1mMol/L)

  色譜儀:“上海吉理LC600”液相色譜儀,四元梯度泵

  配有二極管陣列檢測器、蒸發光散射檢測器和化學工作站

  檢測器:500型ELSD蒸發光散射檢測器

  漂移管溫度為95℃,氮氣流速2.5L/min

  色譜柱:AlltimaC18,5μm,柱長25cm,柱徑4.6mm

  流動相:A為含0.1%TFA的水

  B為含0.1%TFA的乙腈

  梯度:時間0min5min20min

  A液100%100%60%

  B液0%0%40%

  流速:0.6mL/min

  進樣:20μL

  結果:所有組分在25min之內全部流出,各組分完全分離,組分流出順序為:峰1為絲氨酸,峰2為賴氨酸,峰3為谷氨酸,峰4為精氨酸,峰5為脯氨酸,峰6為纈氨酸,峰7為甲硫氨酸,峰8為酪氨酸,峰9為異亮氨酸,峰10為亮氨酸,峰11為苯丙氨酸,峰12為組氨酸。

  一、LC—P600型高壓恒流泵

  LC-P600高壓恒流泵是微處理器智能控制的往復式雙柱塞并聯泵,具有工作壓力高、脈動小、穩定可靠、操作方便等特點。其機械組件由電腦輔助設計,各主要零部件均在世界先進的數控加工中心制造,因此具有加工精確度高、泵體密封性能好、零件的互換性好等特點。

  柱 塞桿采用浮動導向結構,驅動凸輪由高強度合金鋼制造。采用微處理器控制微步驅動電路,使得驅動泵的步進電機運行平穩、噪聲低、速度調節范圍大。LC- P600高壓恒流泵在壓力為0~42Mpa的范圍內,流量可以從0.001mL/min開始到9.999mL/min。這樣滿足了常規分析到微流量分析的 需要。

  在單泵等度分析時,可根據該儀器上全漢字顯示液晶屏的提示語句,通過四個功能鍵就可變換各種操作模式,并且可以方便地設置流量、壓力上下限、持續工作時間、壓力單位等參數。

  LC-P600高壓恒流泵具有過程監測功能。微處理器實時控制泵的流量和檢測輸液壓力。在壓力超限的情況下,報警并自動停止泵的運行。

  可采用LC-WS100工作站,通過RS232接口,控制多達四臺泵的運行,建立多元梯度分析系統。

  LC-P600高壓恒流泵整體結構采用模塊化設計,包括機械部分和電路部分都可以獨立裝拆,因此故障檢查和調換都非常方便。

  LC-P600高壓恒流泵采用雙柱塞并聯泵結構,雙泵頭交替輸液。在同樣輸液量的情況下,它的輸出脈動要比串聯泵低得多,而活塞桿和密封圈壽命要比常規串聯泵長一倍。

  二、LC—UV600型紫外檢測器

  LC-UV600紫外檢測器采用了平行的雙錐孔流通池,樣品池和參照池完全處于對等的條件。錐孔設計的流通池,可以在同樣的池體積情況下,提高通過池孔的光能量,明顯降低了儀器的靜態噪音和信號漂移。

  光路系統采用了精密定位結構,所以精度高、偏移小。氘燈座和光路系統采用熱隔離安裝技術,降低了儀器的穩定時間,并且使氘燈的發熱對光路系統的影響降到最低。

  控 制電路采用多微處理器結構,分別管理信號采集、數據處理、系統控制和通信。LC-UV600紫外檢測器在做等度分析時,可以方便地通過全漢字的液晶屏與七 個功能鍵,設置紫外光波長、濾波常數、輸出量程、運行時間等參數。并且可以實現開關氘燈、光譜掃描、啟動分析程序等功能。

  該 儀器的另一大特點是:LC-UV600紫外檢測器獨特地使用了數字信號直接輸出的線路結構。相比以往的紫外檢測器色譜信號大多數采用模擬信號輸出或者是內 部數字信號處理后,再轉換成模擬信號輸出到色譜數據處理裝置,然后再經過模數轉換。這樣多重的轉換勢必導致信號畸變和干擾。而LC-UV600紫外檢測器 通過RS232接口將數字化信號毫無損失地送到LC-WS600工作站進行對數轉換和積分處理。

  LC-UV600紫外檢測器可以通過LC-WS600工作站上的圖形化界面,方便地實現控制氘燈開關、光譜掃描、繼電器開關、波長掃描等功能。

  (來源:中國化工儀器網)

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